Prosedur Pemeriksaan Laboratorium TES WIDAL

Berikut ini adalah prosedur pemeriksaan laboratorium TES WIDAL untuk mendeteksi adanya infeksi Salmonella typhi dan Salmonella paratyphi

Judul                    : Tes Widal

Metode                :  1. Uji Widal Lempeng ( Slide Agglutination Test / SAT )

                                  2.  Uji Tabung ( Tube Agglutination Test / TAT )

Tujuan                 : Untuk mendeteksi adanya antibodi terhadap Salmonella typhi dan Salmonella paratyphi dalam serum

Prinsip                 :  Kemampuan antibodi dalam serum pasien dalam mengaglutinasi antigen Salmonella O ( antigen somatik ) dan Salmonella H ( antigen flagela ). Titer antibodi ditunjukkan dengan pengenceran tertinggi yang masih dapat menunjukkan aglutinasi.

Alat dan bahan    : 1. Pipet serologi

                               2. Tes tube kecil 75x12mm

                               3. Saline fisiologis (0,9%)

                               4. Waterbath

                               5. Omega Febrile test slide

                               6. Suspensi antigen somatik dan flagela

Dasar teori           : Uji Widal merupakan suatu metode serologi baku dan rutin digunakan sejak tahun 1896. Prinsip uji Widal adalah memeriksa reaksi antara antibodi aglutinin dalam serum penderita yang telah mengalami pengenceran berbeda-beda terhadap antigensomatik (O) dan flagela (H) yang ditambahkan dalam jumlah yang sama sehingga terjadi aglutinasi. Pengenceran tertinggi yang masih menimbulkan aglutinasi menunjukkan titer antibodi dalam serum. Teknik aglutinasi ini dapat dilakukan dengan menggunakan uji hapusan (slide test) atau uji tabung (tube test). Uji hapusan dapat dilakukan secara cepat dan digunakan dalam prosedur penapisan sedangkan uji tabung membutuhkan teknik yang lebih rumit tetapi dapat digunakan untuk konfirmasi hasil dari uji hapusan. Tubuh yang kemasukan Salmonella typhosa akan terangsang untuk membentuk antibody. Antibodi ini bersifat spesifik, artinya hanya bereaksi dengan antigen suspensi kuman tipus, maka akan terjadi aglutinasi. 

Cara kerja            :  A. Slide Aglutinasi

1. Dengan menggunakan pipet khusus untuk tiap pengenceran, sejumlah serum berikut ditambahkan di atas lingkaran slide berdiameter 27mm :

0,08ml  0,04ml  0,02ml  0,01ml  0,005ml

1. Antigen yang telah tersuspensi sepenuhnya ditambahkan sebanyak 1 tetes tepat pada lingkaran slide
2. Campur dan ratakan hingga ke seluruh permukaan dalam lingkaran
3. Dengan perlahan dan sering, guncang dan putar tes slide selama 1 menit hingga terlihat adanya aglutinasi
4. Hasil yang diperoleh dicocokkan dengan titer tabung aglutinasi berturut-turut

1:20    1:40    1:80    1:160    1:320 

1. Dianjurkan untuk mencocokkan hasil titrasi slide dengan teknik tabung.

B.  Tube aglutination

1. Siapkan sebuah rak dengan 10 tabung
2. Tambahkan 1,9ml saline pada tabung 1 dan 1,0 ml saline pada tiap tabung lainnya
3. Tambahkan 0,1 ml serum pasien pada tabung 1, campur dengan baik.
4. Ambil 1,0 ml dari tabung 1 dan pindahkan pada tabung 2, lanjutkan pengenceran secara serial sampai tabung 9 , lalu buang 1 ml dari tabung 9.
5. Tambahkan 1 tetes suspensi antigen yang telah dicampur homogen pada masing-masing tabung. Jangan mencampur suspensi sebelum dipakai.
6. Tabung 1 sampai 9 sekarang mengandung serum yang diencerkan dari 1/20 sampai 1/5120. Tabung 10 hanya mengandung saline dan antigen sebagai antigen kontrol
7. Campur sampai homogendan inkubasi pada suhu berikut, kemudian periksa adanya aglutinasi

Titrasi antigen O pada suhu 50⁰C selama 4 jam

Titrasi antigen H pada suhu 50⁰C selama 2 jam

Antigen kontrol tidak menunjukkan adanya aglutinasi

Hasil                    : Aglutinasi pada antigen menandai adanya antibodi. Titer lebih dari 1/80 menunjukkan adanya aglutinasi.

Interpretasi hasil :  Hasil positif apabila terjadi aglutinasi

           Interpretasi dari uji Widal ini harus memperhatikan beberapa faktor antara lain sensitivitas, spesifisitas, stadium penyakit; faktor penderita seperti status imunitas dan status gizi yang dapat mempengaruhi pembentukan antibodi; gambaran imunologis dari masyarakat setempat (daerah endemis atau non-endemis); faktor antigen; teknik serta reagen yang digunakan

Posted by Unknown on Wednesday, February 6, 2013 - Rating: 4.5

Title : Prosedur Pemeriksaan Laboratorium TES WIDAL
Description : Berikut ini adalah prosedur pemeriksaan laboratorium TES WIDAL untuk mendeteksi adanya infeksi Salmonella typhi dan Salmonella paratyphi ...

Share to

Facebook Google+ Twitter